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【简答题】

1990年对一位因缺乏腺苷脱氨酶基因,而患先天性体液免疫缺陷病的美国女孩进行基因治疗.其方法是首先将患者的白细胞取出作体外培养.然后用逆转录病毒将正常腺苷脱氨酶基因转人培养的白细胞中,再将这些转基因白细胞回输到患者的体内,经过多次治疗患者的免疫功能趋于正常。
(1)为使体外培养细胞的工作成功,必须考虑的培养条件是                        ,培养液须含有                                                    。
(2)在这基因治疗过程中,逆转录病毒的作用相当于基因工程中基因操作工具中的            ,此基因工程中的目的基因是              ,目的基因的受体细胞是                。
(3)将转基因白细胞多次回输患者体内后,免疫能力趋于正常是由于产生        ,产生这种物质的两个基本步骤是        和          。
(4)获得腺苷脱氨酶基因的方法可以是                                    。

参考答案

(1)温度、培养液pH、无菌环境    动物血清、氨基酸、葡萄糖、无机盐、水、维生素
(2)运载体  腺苷脱氨酶基因  患者白细胞 
(3)腺苷脱氨酶  转录、翻译 
(4)  ①用“霰弹射击法”获得目的基因,用限制酶切割含有该基因DNA,然后筛选出目的基因;②用“逆转录法”获得目的基因,这是在有该基因的信使RNA的条件下经过逆转录酶的作用而得到目的基因;③用“化学合成法”获得目的基因,这是在分析腺苷脱氨酶的氨基酸序列后推测基因的核苷酸序列,然后人工合成

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